液相色谱知识

c18色谱柱冲洗方法

2023-08-17 Vink

在使用C18色谱柱进行分析后,为了保护色谱柱和清洗残留的化合物,可以进行冲洗步骤。下面是常见的C18色谱柱冲洗方法:


1. 洗脱剂法:使用有机溶剂如甲醇、乙腈等作为洗脱剂,可以迅速将柱内残留的化合物洗出。常见的洗脱剂用法是将有机溶剂与流动相以一定的比例混合,例如80%甲醇/20%水。将洗脱剂以较高流速(例如1-2 mL/min)通过色谱柱冲洗,通常持续冲洗10-20分钟。


2. 稀酸法:在某些情况下,使用稀酸溶液(如0.1%三氟乙酸)可以更彻底地清洗色谱柱。将稀酸溶液以较高流速通过色谱柱,持续冲洗10-20分钟。


在进行冲洗时,建议将流动相流速稍微增加,但不要超过色谱柱的最大允许流速。此外,如果需要更彻底地清洗色谱柱,可以进行多次冲洗。


最后,注意冲洗后,应将色谱柱再次平衡至分析条件的初始条件,以确保下一次分析的准确性和重复性。