正相色谱柱怎么冲洗
2023-08-25
Vink
正相色谱柱一般使用有机溶剂作为流动相,并使用水作为洗脱剂。冲洗正相色谱柱的步骤如下:
1. 首先,使用有机溶剂(如甲醇、乙醇等)进行平衡,直到色谱柱的基线稳定。这个步骤可以去除柱子中的气泡和空气。
2. 将待测样品溶解在合适的有机溶剂中,注入色谱柱。可以使用自动进样器或手动方式进行。
3. 调节流动相的组成,提供合适的梯度程序。这个步骤可以根据样品的特性和分离需求来确定。可以通过改变有机溶剂和水的比例,使用线性梯度或者梯度程序来进行分离。
4. 根据样品的保留行为和分离效果,调整流速和梯度程序,以优化分离效果。
5. 当需要冲洗正相色谱柱时,通常使用纯水或者低极性的溶剂(如醋酸、甲醇与水的混合物)进行洗脱。可以使用纯水或者低极性溶剂进行重复洗脱,直到色谱柱恢复到初始条件。
6. 最后,使用有机溶剂重新平衡柱子,并进行下一次分析或保管。
需要注意的是,在冲洗正相色谱柱时,柱子是非常重要的分析工具,因此需要谨慎操作,避免使用过于极性或非极性的溶剂,以免对柱子造成不可逆的损坏或影响柱子的使用寿命。