液相色谱知识

高效液相色谱柱异常排除

2023-10-09 Vink

当高效液相色谱(HPLC)柱出现异常时,可以采取以下步骤进行排除:


1. 检查压力是否正常:如果压力异常,需要检查泵是否正常工作,包括泵的流量设置、泵头密封圈是否完好等。同时,检查连接管路是否有堵塞、漏液等情况。

2. 检查流动相是否正确:流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀也可能导致双峰出现。需要确保流动相的正确配比和PH值调节,以避免对色谱柱产生不必要的损害。

3. 检查色谱柱是否平衡:每次运行前要给予足够的时间平衡色谱柱,以避免因色谱柱未平衡而导致的双峰现象。

4. 检查流速是否稳定:流速的变化也可能导致保留时间漂移和双峰出现。需要确保输液泵流速稳定,以避免对色谱图产生影响。

5. 检查进样过程是否正常:进样过程中进入空气或样品组分的吸收低于流动相,都可能导致双峰出现。需要确保在进样过程中避免空气进入,并选择合适的样品组分吸收波长。

6. 检查温度控制是否适宜:温控不当可能会导致保留时间漂移和双峰出现。需要确保柱温箱温度恒定,以避免对色谱柱产生影响。

7. 检查过滤器是否堵塞:如果流动相或溶剂中存在杂质,可能会导致过滤器堵塞,从而影响流动相的流速和色谱图的稳定性。需要定期更换过滤器芯,并使用过滤后的流动相。

8. 检查单向阀是否损坏:单向阀损坏可能导致液相色谱出现双峰。需要更换损坏的单向阀。


总之,当高效液相色谱柱出现异常时,需要从多方面进行检查和排除,以确保液相色谱的正常运行和结果的准确性。