液相色谱知识

正确使用高效液相色谱柱的关键

2023-11-27 Vink

正确使用高效液相色谱柱的关键步骤包括:


1. 过滤流动相和样品:在注入样品和流动相之前,应进行过滤,以避免杂质和颗粒物进入色谱柱,造成堵塞或损坏。

2. 正确选择流动相:流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中或长时间保留在柱中。流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果。同时,降低柱压降,延长液体泵的使用寿命。流动相的物化性质要与使用的检测器相适应,如使用UV检测器,最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。

3. 保护柱:在加装保护柱的同时,应确保保护柱与分析柱粒径一致或稍大,这样可以延长色谱柱的使用寿命。

4. 避免过高的柱压:过高的柱压会导致色谱柱寿命缩短。为了避免过高的柱压,可以采取降低流速、使用流速梯度或手动进样阀等方式。

5. 正确及时的冲洗:在样品分析结束后,应进行充分的冲洗,以去除残留在色谱柱中的杂质和污染物,为下次分析做好准备。

6. 注意温度和酸碱度:温度和酸碱度对色谱柱的分离效果和寿命都有一定影响。应遵循色谱柱的使用说明,合理控制温度和酸碱度。

7. 脱气:在流动相配制好后,一定要进行脱气处理。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

8. 避免使用极端条件:应避免长时间使用高流速或高压力,以免造成色谱柱过度磨损或损坏。

9. 定期维护和检查:定期对色谱柱进行检查和维护,包括检查色谱柱头的污染情况、更换填料等,以确保其正常运转。

10. 记录使用情况:每次使用色谱柱后,应记录使用情况,包括使用时间、流速、压力、温度等参数,以便后续分析和维护。


遵循以上关键步骤,可以确保高效液相色谱柱的正确使用和维护,提高分析结果的准确性和稳定性。