液相色谱压力和基线问题解析

液相色谱中压力问题和基线问题及其解决方法如下：

1. 压力问题：

  * 压力低：

    * 低粘度流动相：使用Kozeny-Carmen或类似方程计算预期压力。

    * 活塞密封垫泄漏：检查是否存在漏液现象，必要时更换相关部件。

    * 系统泄漏：检查是否有漏液，拧紧或更换相关漏液部件。

    * 系统中有气泡：确保溶剂瓶或溶剂管线经过灌洗，且purging阀关闭，脱气机正常工作。

    * 溶剂过滤吸头、单向阀及管线等压力传感器之前的部件堵塞：用分段排除法检查系统管路是否堵塞。

    * 泵流速故障：用计量过的器皿判断泵流量是否准确，确认故障报修。

  * 压力高：

    * 高粘度流动相：使用Kozeny-Carmen或类似方程计算预期压力。

    * 泵流速故障：用计量过的器皿判断泵流量是否准确，确认故障报修。

    * 压力传感器之后的管路堵塞、检测器流通池、自动进样器进样针或针座堵塞：用分段排除法确定堵塞的位置，冲洗（反冲）或更换相关部件。

    * 保护柱或分析柱堵塞：冲洗（反冲）或更换相保护柱或分析柱。

  * 压力波动：

    * 单向阀堵塞造成：超声清洗单向阀。

    * 管路中有气泡：重新purge管路。

2. 基线问题：

  * 基线波动、基线漂移：

    * 系统未平衡：至少10倍柱体积平衡系统。注意室温是否稳定避免空调出风口直吹仪器。

    * 流通池中有气泡：冲洗流通池。

    * 保护柱被污染：更换保护柱。

    * 检测器污染：按照厂商要求清洗流通池。

    * 溶剂被污染：更换溶剂。

    * 检测器灯能量低：更换相关灯。

    * 梯度洗脱：使用纯度更高的溶剂或选择其他波长，如还存此情况属正常现象。

    * 系统泄漏：检查泄漏位置，拧紧或更换泄漏处部件。

    * 温度波动：使用柱温箱，如条件要求苛刻可使用柱前加热模块及柱后冷却模块。控制室温，避免空调出风口直吹仪器。

    * 色谱柱污染：更换保护柱必要时更换分析柱。

    * 泵未适当混合溶剂：在梯度洗脱时如仪器为低压系统确保比例阀正常工作，如仪器时高压系统确保泵流速精准混合器正常工作。

    * 溶剂过滤器堵塞：超声（浸泡）清洗溶剂过滤器，应注意材质是否可以超声。

  * 峰形问题（以展宽为例）：

    * 系统未平衡：用至少10倍柱体积平衡系统。

    * 进样溶剂过强：确保进样溶剂强度与流动相强度相当或更弱。

    * 进样体积过高：减少进样体积。

    * 柱外体积过高：减小样品浓度。

    * 温度波动：使用柱温箱。

    * 保护柱污染或失效：更换新的保护柱。

  * 基线噪音大：

    * 流动相中有气体——溶剂脱气;

    * 流动池中有气泡——在出口处使用0.009”的管路;

    * 色谱柱上的污染物被洗脱——平衡系统，直至基线稳定;如样品中有保留非常强的组分，可设置强洗脱程序;

    * 渗漏——此时应修复渗漏，重新连接或更换接头;

    * 检测器灯能量低——更换灯;

    * 灵敏度太高——使用合适的采样频率，调节增益（如ELSD检测器）;

    * 检测器流动池脏——清洁流动池;

    * 电噪音——除去电噪音的来源:屏蔽电缆,清洁触点;

    * 采样频率设置过大——一味追求高采样频率，可能对灵敏度没有任何帮助，同时也会产生比较大的噪音:UV检测器推荐降低采样频率,HPLC推荐1-5Hz,UPLC推荐20Hz。

  * 同步的基线噪音：大多数情况下都是泵引起的，泵头中存在空气——将溶剂脱气，并重新灌注泵; 单向阀问题——超声清洗单向阀或更换; 柱塞杆断裂——更换; 混合问题——更换一个体积更大的Mixer,以增加系统体积; 电噪音——改变电路,除去