反相柱的极性较大的化合物在柱子中的保留时间相对较短,因此它们通常会先出峰。较大极性的化合物在反相柱上与柱子的非极性固定相相互作用较弱,因此在洗脱过程中很快地被洗脱出来。反相柱的固定相通常是由含有亲油基团(如碳链或苯环)的非极性化合物构成的。在反相柱上,较极性的化合物与非极性固定相之间的作用力较弱,容易从柱子上洗脱下来。与此相对应的是,极性较小的化合物与非极性固定相之间的作用力较强,容易被固定相保留
2023/07 Vink
反相柱的上样量没有规定的固定值,而是根据柱子的尺寸、样品类型、分析目的和仪器要求等因素来确定。一般来说,上样量应该在柱子承受范围内,并且要保持在柱子的线性范围内,以避免过载或损坏柱子。一般情况下,常规分析中的上样量在微克至毫克范围内,对于一般的HPLC柱,上样量通常在1-10微克之间。对于高灵敏度的分析或特定样品的分析,上样量可能会低于1微克。同时,在上样过程中也应考虑样品的溶解度,不要过量上样导
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反相柱和正相柱是两种常见的色谱柱类型,它们在分析样品时有一些重要的区别。1. 原理不同: 反相色谱是基于液体相对于固定相而言具有较强极性的原理,常用的固定相是疏水性的碳链;而正相色谱是基于液相对固相而言具有较弱极性的原理,常用的固定相是亲水性的硅胶或氨基硅胶。2. 选择性不同: 由于反向和正相柱的固定相性质不同,它们对样品的选择性也不同。反相柱通常用于非极性或中等极性的化合物,而正相柱则更适用于极
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在反相色谱中,化合物的极性大小对出峰顺序有较大影响。一般情况下,极性较小的化合物会先被洗脱出来,而极性较大的化合物则停留时间较长,后被洗脱。具体来说,以下是一般情况下极性大小出峰顺序的规律:1. 非极性化合物:这些化合物与反相柱的填料相互作用较弱,因此在反相色谱中停留时间较短,先被洗脱出来。2. 低极性化合物:这些化合物具有一定的极性,与反相柱的填料相互作用较强,但仍相对较小,停留时间较长,稍后被
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在反相柱上分离化合物时,一般的洗脱顺序是从极性物质向非极性物质逐渐增加。这是因为反相柱的填料通常是疏水性的,与溶剂中的水相互作用较差,因此溶于水中的极性化合物在柱上停留时间较长,洗脱顺序会受到他们的极性程度的影响。下面是常见的洗脱顺序:1. 非极性化合物:这些化合物不与填料具有明显相互作用,所以在反相柱上停留时间较短,一般会在初始的洗脱阶段被洗脱出来。2. 中极性化合物:这些化合物具有一定的极性,
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高效液相色谱柱的柱效参数(Column Efficiency Parameters)是衡量柱子分离性能和效率的重要指标。以下是常见的柱效参数:1. 理论板数(Theoretical Plates):理论板数是衡量柱子分离效果和分离程度的一个重要参数。它表示在理想情况下,一组理论板(效率相等的连续分离阶段)能够实现的柱效。一般用N表示,计算公式为N = 16 * (tr / W) ^ 2,其中tr为
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反相高效液相色谱柱(reversed-phase HPLC column)是一种常用的HPLC柱,用于分离非极性或中极性化合物。反相柱是HPLC分析中应用最广泛的柱类型之一。反相柱的填料通常是由一种具有亲水性的羧酸类吸附剂(如C18、C8等)涂覆在硅胶或者亲水性载体上构成。这种亲水层在分析过程中形成“水膜”,而非极性或中极性溶质在该层上不易被吸附,从而实现了溶质的分离。反相柱对于非极性或中极性化合
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液相柱体积计算公式液相柱的体积可以通过以下公式计算:体积(V) = π * r² * L其中,V 是液相柱的体积(单位为 mL 或 cm³);π 是圆周率,约为3.14;r 是液相柱的半径(单位为 cm);L 是液相柱的长度(单位为 cm)。注:在实际计算中,常常使用直径(D)而非半径(r)表示液相柱的尺寸。可以使用以下公式将直径转换为半径:r = D / 2所以,液相柱的体积(V)也可以用以下公
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