正相色谱柱内的填料通常是疏水性的,如C18、C8或C4等疏水基团的硅胶。这些填料的疏水性使它们适用于分离极性化合物。如果将正相色谱柱碰水,水分子会与填料表面相互作用,导致柱内填料失去疏水性,进而影响分离性能。此外,水分子还会导致填料脱水和收缩,可能引起柱床塌陷或柱性能下降。另外,柱床在干燥状态下可能存在空隙,水分子会进入这些空隙中并与填料发生反应,形成团块或沉淀。这将导致柱床不均匀和堵塞,严重影响
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正相色谱柱和反相色谱柱是两种常用的色谱柱类型,它们主要在填充物的性质和溶剂选择上有所不同。以下是它们的主要区别:正相色谱柱:- 填充物:正相色谱柱通常采用极性较强的填充物,如硅胶(silica gel)或氮化硅(diatomaceous earth)等。- 溶剂选择:正相色谱柱使用的溶剂是非极性溶剂,如正己烷、醚类、石油醚等。这些溶剂与填充物的相互作用较小。- 分离机制:在正相色谱柱上,样品中的非
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正相色谱柱通常使用C18、C8或C4等疏水基团的色谱填料,用于分离极性化合物。以下是正相色谱柱的冲洗和保存方法:冲洗方法:1. 预冲洗:新购买的正相色谱柱在使用之前需要进行预冲洗。常见的预冲洗方法是使用有机溶剂(如甲醇或乙腈)预冲洗柱床,以去除色谱柱内的残留物。2. 色谱柱平衡:在每次使用前,将流动相通过色谱柱进行平衡,以确保柱内填料的湿润程度和正确的流动相配比。3. 样品冲洗:在进行一系列样品分
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在使用C18色谱柱进行分析后,为了保护色谱柱和清洗残留的化合物,可以进行冲洗步骤。下面是常见的C18色谱柱冲洗方法:1. 洗脱剂法:使用有机溶剂如甲醇、乙腈等作为洗脱剂,可以迅速将柱内残留的化合物洗出。常见的洗脱剂用法是将有机溶剂与流动相以一定的比例混合,例如80%甲醇/20%水。将洗脱剂以较高流速(例如1-2 mL/min)通过色谱柱冲洗,通常持续冲洗10-20分钟。2. 稀酸法:在某些情况下,
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C18色谱柱是一种反相色谱柱,其极性较强,常用于分离非极性化合物。在C18色谱柱上,一般来说,极性较小的化合物会在前面出峰,而极性较大的化合物会在后面出峰。以下是一些常见的化合物的出峰顺序:1. 饱和烃类:饱和烃类的极性最小,因此它们通常在C18色谱柱上最早出峰。2. 不饱和烃类:不饱和烃类比饱和烃类的极性稍高一些,因此它们的出峰顺序会稍靠后。3. 脂肪酸类:脂肪酸是一类较为极性的化合物,因此它们
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当C18色谱柱堵塞时,可以采取以下一些措施来进行冲洗和恢复柱子的性能:1. 逆流冲洗:将适当的洗脱剂(例如甲醇或乙腈)以逆流的方式通过色谱柱,以清除堵塞的物质。可以先将洗脱剂以适当的流速从柱底排出,然后再从柱顶泵入,反复进行几次。这有助于打散柱内的样品残留物和附着物。2. 酸碱洗脱:在逆流冲洗之前,可以考虑使用酸性或碱性溶液对色谱柱进行清洗,以溶解和去除堵塞物。选择合适的酸或碱溶液的浓度和pH值,
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在保存C18色谱柱的时候,可以采取以下一些措施来保护色谱柱和保存其性能:1. 清洗:在存储之前,清洗色谱柱以去除残留的样品或其他污染物。可以使用适当的洗脱剂(例如甲醇或乙腈)进行清洗。清洗的方法可以是逆流冲洗,即将洗脱剂以适当的流速从柱底排出,然后再从柱顶泵入,反复进行几次,直到柱子彻底清洗干净。2. 干燥:在清洗干净后,将色谱柱弃液,并用氮气或气体(如干燥空气)将柱子吹干。这将有助于去除残留的洗
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C18色谱柱是一种广泛应用于分离和纯化化合物的常见色谱柱。在使用C18色谱柱之前,有时需要对其进行活化,以确保最佳的分离效果和性能。以下是一些常用的C18色谱柱活化方法:1. 洗脱剂活化法:使用有机溶剂(例如甲醇或乙腈)作为洗脱剂,以高流速(例如1-2 mL/min)通过色谱柱进行洗脱。可以使用纯有机溶剂或者混合有机溶剂/水组成的溶剂体系进行洗脱。通常需要洗脱柱体积的5-10倍才能完全活化柱子。2
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